Phát triển các kháng thể đơn dòng để phát hiện hoại tử hepatopancreatitis tôm penaeid.

Bradley-Dunlop DJ, Pantoja C, Lightner DV.

nguồn

Cục Thú y Khoa học và Vi sinh vật học, Đại học Arizona, Tucson, Arizona 85721, [email protected]

Tóm tắt

Các kháng thể đơn dòng (kháng thể đơn dòng) được sản xuất chống lại vi khuẩn hoại tửhepatopancreatitis (NHP-B) của tôm penaeid. Các xét nghiệm kháng thể đơn dòng thửnghiệm trong dot-immunoblot (D-IB) có khả năng phát hiện NHP-B trong các mẫu gan tụythu được từ tôm thẻ chân trắng Litopenaeus vị thành niên hấp hối trong một bệnh nhiễm trùng NHP-B thực nghiệm gây ra. Các kháng thể đơn dòng cũng được chiếu bởi hóa mô miễn dịch (IHC) bằng cách sử dụng đệ trình trường hợp đã được xác định là bị nhiễm bệnh không chỉ bằng mô học, nhưng cũng phản ứng dây chuyền polymerase (PCR) và lai tạo tại chỗ (ISH) xét nghiệm bằng cách sử dụng digoxigenin cụ thể (DIG) được dán nhãnthiết bị thăm dò trên phần mô học chế biến từ tôm tự nhiên bị nhiễm bệnh. Hai trong sốcác kháng thể đơn dòng đã được chọn để phát triển các phương pháp phát hiện choNHP. Các kháng thể đơn dòng đã được thử nghiệm bằng cách sử dụng các phương pháp IHC rượu formalin-acetic acid Davidson (AFA) phần mô cố định và xác định NHP-Btế bào bị nhiễm bệnh và các mô trong một mô hình tương tự như nhìn thấy được bằngđầu dò DIG-dán nhãn NHP gen cụ thể. Không có các kháng thể đơn dòng đã phản ứngvới mô từ tôm cụ thể tác nhân gây bệnh (SPF) miễn phí hoặc với mô tôm bị nhiễm một loại vi khuẩn giống như rickettsia, Vibrio sp, Campylobacter sp, sp Spiroplasma.. Cáckháng thể đơn dòng đã được tìm thấy được tiêu cực chống lại các sinh vật khác, chứng minh rằng họ là loài cụ thể và hữu ích cho việc phát hiện chẩn đoán nhanh chóng củaNHP-B.